心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)提纯及ELISA的建立

目的心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiactroponinⅠ,cTnⅠ)的提纯及酶联免疫分析方法的建立。方法从猝死健康人心脏中,提取人心肌肌钙蛋白Ⅰ作为抗原,用其免疫新西兰雌性大耳白家兔,制备出抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ抗体,采用夹心方法,建立cTnⅠ酶联免疫吸附分析法。结果从人心肌中提取出11.7mgcTnⅠ,心肌肌钙蛋白Ⅰ抗血清滴度达1∶100000,Ka=2.38×109Lm/ol。方法学指标:灵敏度为0.2ngm/l;精密度,批内、批间变异系数分别为CV=3.8%和CV=8.2%;准确度,平均回收率99.7%;特异性,与心肌肌钙蛋白T、心肌肌钙蛋白C、肌酸磷酸激酶(CK)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)均无交叉反应。用该方法和进口试剂盒对32例急性心肌梗死(AMI)患者和40例健康人血中cTnⅠ水平进行检测,两者符合率分别为93.7%、95.0%。结论该方法适于临床常规检验及科研工作需要,具有广泛应用前景。     

细胞凋亡信息分子Fas、FasL和NF-κB在氟化物作用后破骨样细胞凋亡过程中的表达

目的研究氟化物作用后破骨细胞样细胞凋亡过程中细胞凋亡配体Fas、FasLFasLigand和核因子NF-κB的表达变化。方法在培养基中分别加入不同浓度的氟化钠培养破骨样细胞,以免疫组织化学染色方法观察细胞的Fas、FasL和NF-κB表达。结果Fas、FasL在破骨样细胞表达量随培养基中氟化钠浓度增高而增高;NF-κB的表达量随培养基中氟化钠浓度增高而降低,两者均具有剂量依赖关系。结论在氟化钠所致的破骨细胞凋亡过程中,Fas,Fas-L的表达随氟化物浓度增高而加强;而核因子NF-κB的表达随氟化物浓度增高而减弱,两者都具有剂量依赖关系。     

关于外照射慢性放射病及其剂量阈值的探讨

1前言人们对外照射慢性放射病（以下简称慢放病）的认识正在不断的深化。过去由于西方国家的防护条件较好，射线工作人员的受照剂量低于慢放病的阈值，罕见慢放病的发生，不承认慢放病的存在，而只认为在较高剂量率水平下的长期分次照射或迁延照射可能对人体各个器官或组织的损伤。但是在前苏联核工业发展的初期，为了打破美国的核垄断，在其第一个生产堆（A厂）和后处理厂（B厂）投产的初期，工作人员在极差的防护条件下忘我地工作，以至于在A厂和B厂慢放病的患病率分别高达5．8％和22．5％。在我国，由于解放前和建国初期射线设备落后，…     

IRM-2近交系小鼠的遗传监测

目的 观察IRM-2小鼠基因纯合性和遗传质量。方法用电泳法对IRM-2近交系小鼠进行了生化标记基因检测,并做了毛色基因和皮肤移植试验。结果分析测定了第23代小鼠13条染色体上25个基因位点和第38代的13个生化标记基因,所查基因位点全部纯合;同系异体问背部皮肤移植100d后,未见排斥现象,为同系组织遗传性;与BALB／c白化系小鼠交配进行的毛色基因测试,杂交第一代小鼠的毛色与IRM-2小鼠一致,均为浅桂皮色,基因型为AAbbCCDD。结论可以认为,IRM-2小鼠是遗传上高度纯合的近交系小鼠。     

MUTAGENICITY RESEARCH OF No.Ⅱ DRUG

目的与方法 :用Ames试验、CHO_K细胞染色体畸变试验及微核试验对Ⅱ号药进行了致突变性研究。 结果 :Ames试验在1～5000μg/皿剂量范围内加与不加S9 条件下 ,4个菌株的回变菌落数均未有2倍以上的增加 ;微核试验显示在25～125mg/kg剂量 ,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核细胞率(MNCF)与对照组比较无显著性差异(P>0.05) ;CHO_K细胞染色体畸变试验显示在不加S9 条件下 ,31～250μg/ml剂量范围内染色体畸变率小于5 %,在加S9 条件下250μg/ml剂量组畸变率为8 %,属可疑阳性。 结论 :Ames试验和微核试验均为阴性 ,在高剂量组加S9 条件下 ,染色体畸变率为可疑阳性 ,表明在高剂量条件下 ,Ⅱ号药对体细胞有可疑遗传毒性     

微量元素锌、铜、硒对胎盘镉转运的影响

目的:评价微量元素锌、铜、硒对胎盘镉转运的影响。方法:于2002年11月至2003年1月选择湖北省大冶市的待产孕妇,进行问卷调查和体格检查,同时检测全血锌、铜、硒和镉水平。采集新生儿脐血和胎盘标本用于测定镉含量。分析孕妇锌、铜、硒的营养状况是否与胎盘镉转运存在显著关联。结果:47例20～34岁孕妇全血镉(μg/L)为0.8～25.2,新生儿脐血镉(μg/L)为0.020～1.48,孕妇血镉显著高于脐血镉(T=564P<0.01)。孕妇胎盘组织镉含量(μg/g干重)为0.082～3.97。多因素线性回归分析显示,低血铜孕妇与血铜水平正常者相比新生儿脐血镉显著增加,低血锌孕妇的胎盘镉显著高于血锌正常者,低血硒孕妇的胎盘镉显著低于血硒正常者。结论:微量元素铜、锌、硒可能影响胎盘镉转运。     

源于脾干细胞的破骨细胞诱导生成及培养

目的建立一种可以获得大量破骨细胞或破骨样细胞的方法，以便进行原发性骨质疏松有关破骨细胞的研究。方法C57雌性小鼠经尾静脉注射5-氟脲嘧啶后，取脾细胞悬液在含有rmIL-3，rhIL-6和胎牛血清(FCS)以及牛血清白蛋白(BSA)的α-MEM-琼脂半固体培养7d左右，获得脾脏造血干细胞集落；此集落再以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)诱导生成破骨样细胞。结果经活体观察、酒石酸-抗酸性磷酸酶(TRAP)染色、扫描电镜检查，证实所得细胞为破骨细胞。结论建立了一种获得大量破骨细胞或破骨样细胞方法，即源于脾干细胞的破骨样细胞的诱导生成及其培养。     

MTT比色法检测人肿瘤细胞辐射敏感性的体外研究

目的 探讨MTT比色法在人肿瘤细胞辐射敏感性检测中的价值.方法 用1、2、4和8 Gy的γ射线照射肝癌细胞(HepG2)、食管癌细胞(EC-9706)和乳腺癌细胞(MCF-7),观察存活分数(SF)和平均致死剂量(D0).结果 γ射线剂量为2、4、8 Gy时,HepG2 和EC-9706的SF均显著低于MCF-7(P＜0.05、＜0.01);D0值HepG2 (2.36 Gy)＜EC-9706(2.70 Gy)＜MCF-7(3.95 Gy).HepG2 辐射敏感性最高,MCF-7最低.结论 MTT法检测人肿瘤细胞辐射敏感性简便、快捷且准确性较高,对指导临床个体化放疗有重要作用.     

天然蛇床子素的抗肿瘤活性实验研究

背景与目的:蛇床子素是天然存在的香豆素化合物,本研究旨在检测天然蛇床子素在小鼠体外和体内的抗肿瘤活性.材料与方法:体外蛇床子素对人肺腺癌细胞A549和人肝癌细胞Bel-7402的抗肿瘤实验采用MTF法,并计算IC50;体内蛇床子素对小鼠肝癌H::实体瘤的抗肿瘤实验采用常规的抗肿瘤实验方法,用昆明种小鼠,雌雄各半,设空白对照组、顺铂(5 mg/kg)和香菇多糖(1 mg/kg)2个阳性对照组和1.11、1.67、2.50 mg/kg 3个剂量蛇床子素给药组,每组12只小鼠;用蛇床子素给小鼠灌胃后观察抑瘤率和胸腺、脾指数及肝重量变化,采用t检验进行数据的统计学处理.结果:蛇床子素体外对肺腺癌细胞A549和人肝癌细胞Bel-7402的半数抑制浓度IC50分别为:67.83、123.92 μg/ml;体内对小鼠肝癌H22实体瘤抑瘤率达62%～73%,各给药组与空白对照组比较差异均具有统计学意义(P＜0.01),脏器指数及重量与空白对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05),而与阳性对照顺铂组间的差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:蛇床子素体外和体内对实验肿瘤均有明显的抗肿瘤活性,而且在给药剂量下实验动物未出现任何毒性反应.     

硫酸头孢匹罗的合成工艺改进

目的 改进第四代头孢菌素类药物硫酸头孢匹罗的合成工艺。 方法 以7-苯乙酰胺基-3-氯甲基头孢烷酸对甲氧基苄酯（GCLE）为起始原料，先与2,3-环戊烯并吡啶反应，然后脱去4位羧基保护，再脱去7位苯乙酰基保护并对7位进行取代，最后成硫酸盐。 结果与结论 目标化合物结构经¹H-NMR、IR谱得到确证。改进后总收率为34%。